BEOL青岛贝尔智能揭秘工业微生物菌种保存的方法2022.5.7

液氮保存已成为工业微生物菌种保存的最好方法。BEOL青岛贝尔智能揭秘工业微生物菌种保存的方法:

具体方法是：将细胞悬浮在一定的分散剂中，或直接冷冻琼脂培养基上培养的菌株，然后移动到液氮中(-196 ℃)或液氮的气相环境 (-156℃)保存。液氮冷冻保存应严格控制冷却速度。

液氮冷冻保存微生物菌种的具体步骤是：制备冷冻保存菌种的细胞悬浮液，分装到0.5～1 mL特殊耐低温玻璃安瓿或液氮冷藏专用塑料瓶中，玻璃安瓿用酒精喷灯密封。然后以 (1-2) ℃/min冷却速度冷却，直到温度达到相对温度以上的细胞冻结点( 通常是 -30 ℃)。细胞冻结后，冷却速度降至1 ℃ /min，直到温度达到-50 ℃，将安瓿迅速移入液氮罐中 (-196 ℃ )或气相(-156 ℃ )中保存。

如果无控速冷冻机，则一般可用如下方法代替：将安瓿或液氮瓶置于-70 ℃冰箱里冷冻4 h，然后迅速移入液氮罐保存。此外液氮冷冻保存，最常用的冷冻保护剂是二甲亚啶和甘油，使用浓度一般为甘油 10 %，二甲亚砜5 %。使用的甘油一般用高压蒸汽灭菌，二甲亚砜进行过滤灭菌。